甜菜夜蛾围食膜肠粘蛋白基因SeM-8的克隆、序列分析及在不同组织中的表达检测

昆虫肠粘蛋白（invertebrateintestinalmucin,IIM）是围食膜（peritrophicmembrane,PM）的重要蛋白组分之一，在保护昆虫免受微生物侵染方面起着非常重要的作用。本研究以甜菜夜蛾Spodopteraexigua5龄幼虫中肠总RNA为模板，根据已知的甜菜夜蛾肠粘蛋白SeIIM-8基因的cDNA序列（GenBank登录号：ABW06596）设计引物，利用RT-PCR技术扩增得到甜菜夜蛾肠粘蛋白基因SeM-8，序列分析发现其开放阅读框（openreadingframe,ORF）长2703bp，编码900个氨基酸残基，预测分子量为95.7kDa。序列分析表明，其氨基酸序列（GenBank登录号：GU255994）与棉铃虫Helicoverpaarmigera（Hübner），粘虫Mamestraconfigurata和小菜蛾Plutellaxylostella肠粘蛋白的一致性分别为48%，49%和45%。Westernblot分析结果表明，SeM-8粘蛋白在甜菜夜蛾即将孵化的卵和5龄幼虫的围食膜、中肠和粪便中都有存在，在5龄幼虫马氏管、脂肪体、唾腺、血淋巴等组织部位没有发现。本研究为进一步研究IIM结构和功能，寻找生物防治新靶标奠定了理论基础。