家蚕胚胎细胞系Bm-Em-1的建立和特性研究

昆虫细胞系在病毒生物学、基因功能的研究以及杆状病毒表达系统生产重组蛋白的应用中发挥着重要的作用。本研究由家蚕Bombyxmori“大造”品种反转期胚胎建立了一株细胞系Bm-Em-1，在含10％胎牛血清的TNM-FH培养基中已传代40余代。显微观察表明，细胞形态主要为圆形和短梭形，细胞染色体呈短棒状和颗粒状，数量多、异倍化，符合典型的鳞翅目昆虫细胞染色体特征。RAPD鉴定结果表明，该细胞系来源于家蚕胚胎，其扩增谱带与BTI-Tn5B1-4和Sf-9等细胞系明显不同。生长曲线测定结果表明，第28代细胞的群体倍增时间为82.2h。病毒敏感性测定显示，该细胞系不能被苜蓿银纹夜蛾Autographacalifornica核型多角体病毒（AcMNPV）感染，但对家蚕核型多角体病毒（BmNPV）高度敏感，96h的感染率为91.3％。结果说明该细胞系可作为家蚕病毒离体复制、BmNPV表达系统以及家蚕基因功能研究的理想材料。