桔小实蝇幼体及成虫残体DNA条形码识别技术的建立与应用

实蝇类害虫多为国内外检疫对象，其鉴定识别方法主要依据成虫的外部形态特征，而传统的形态学识别法对口岸经常截获的幼体及残缺的虫体，则无能为力。本研究以桔小实蝇Bactroceradorsalis的幼体（卵、幼虫、蛹）以及成虫残体（足、翅、头部、胸部、腹部）为对象，利用DNA条形码技术，构建实蝇类害虫快速鉴定技术体系，并以其他4种常见实蝇（包括番石榴实蝇B.correcta、瓜实蝇B.cucurbitae、南亚果实蝇B.tau、柑桔大实蝇B.minax）为对象对该技术体系进行应用验证。结果显示，桔小实蝇幼体以及成虫残体的碱基序列与数据库中靶标种COⅠ基因碱基序列的一致性为99.51%~99.84%，其他4种实蝇相应序列与数据库中靶标种COⅠ基因序列的一致性分别为100%，100%，99.81%~99.83%和100%；以邻接法（NJ法）构建系统发育树，靶标种实蝇均与数据库中对应种实蝇聚为一支，且置信度均为100%。以K2-P模型计算种内及种间遗传距离得出，5种实蝇的种间遗传距离为0.0597~0.2363，平均为0.1693；种内遗传距离为0.0000~0.0041，平均为0.0019。这些结果表明，基于DNA条形码的物种识别技术完全可用于口岸截获的实蝇类害虫幼体及残体的准确鉴定。