中华蜜蜂DNA甲基化转移酶Dnmt3基因克隆及表达谱分析

为探究中华蜜蜂Apisceranacerana的DNA甲基化模式，本研究采用RTPCR技术克隆了中华蜜蜂DNA甲基化转移酶3（Dnmt3）基因(GenBank登录号为JQ740768)；采用荧光定量PCR检测不同发育时期工蜂（4日龄蛹,1,7和30日龄成年蜂及产卵工蜂）和蜂王（4日龄蛹，1日龄蜂王和产卵蜂王）头部的Dnmt3基因mRNA的表达量。结果表明：该基因cDNA序列全长2277bp，编码758个氨基酸残基，预测的蛋白分子量为88.24kD，等电点为7.85。将中华蜜蜂与其他物种的Dnmt3基因的结构域进行比对，同时将该基因推导的氨基酸序列与其他物种的Dnmt3氨基酸序列进行同源性比对和系统发育分析，发现与西方蜜蜂的Dnmt3序列一致性高达99%。该基因在工蜂和蜂王不同发育时期均有表达，1日龄工蜂与7日龄工蜂中没有显著差异(P>0.05)，30日龄工蜂中的表达量显著高于前两者(P0.05）。这种表达情况提示其可能与工蜂劳动分工及蜜蜂卵巢发育有关。