家蝇MdSOD3基因的鉴定及其在抵抗重金属胁迫中的作用

超氧化物歧化酶（SOD）是一种重要的抗氧化酶，在昆虫抗氧化保护过程中起着重要作用。本研究通过RT-PCR技术鉴定了家蝇MuscadomesticaMdSOD3基因(GenBank登录号为JQ408979)，cDNA序列817bp，开放阅读框534bp，推导的多肽序列含有177个氨基酸。同源性分析及NJ法系统分析表明MdSOD3与其他物种的Cu/ZnSOD关系较近。荧光定量PCR检测该基因在家蝇幼虫脂肪体、肠、表皮和血细胞中不存在差异表达；在受到不同浓度重金属Cd2+刺激时，MdSOD3基因呈诱导性表达，5mmol/L时表达量最高。通过RNAi策略技术成功敲低MdSOD3表达水平。将RNA干扰60h的幼虫置于5mmol/LCd2+处理24h后死亡率明显升高，并且出现中毒表象。NBT活性染色检测到体外重组表达的MdSOD3具有明显的酶活性。结果提示MdSOD3基因可能在家蝇抗逆防御过程中起着重要作用。