二化螟Minus-C气味结合蛋白的分子克隆及功能鉴定

气味结合蛋白（odorantbindingproteins，OBPs）在昆虫对寄主气味的感受中起重要作用，但有关Minus-COBP及其功能的报道很少。本研究通过基因组数据分析并利用RACE技术，克隆和鉴定了二化螟Chilosuppressalis(Walker)的一个Minus-COBP基因，命名为CsupOBP1（GenBank登录号：KC492498）。CsupOBP1基因的开放阅读框长423bp，编码141个氨基酸，其中N端的18个氨基酸为预测的信号肽序列，成熟蛋白序列中具有4个保守的半胱氨酸位点。实时定量PCR分析显示，该基因在幼虫头部及成虫雌雄足、翅和雄性触角等化感组织中高表达，其中在雄虫触角内的表达量显著高于雌虫触角。利用荧光竞争结合实验对CsupOBP1重组蛋白与38种化合物的结合特性的测定表明，重组CsupOBP1与β紫罗兰酮的结合能力最强（Ki=9.53μmol/L）。触角电位测定表明，二化螟成虫可对β-紫罗兰酮产生显著的触角电生理反应，但雄虫反应明显强于雌虫，与结合试验及雄虫触角中CsupOBP1的表达量显著高于雌虫触角的测定结果相一致。鉴于β-紫罗兰酮是水稻等植物中普遍存在的一种芳香气味组分，推测CsupOBP1可能通过对该气味的结合和运输，从而在二化螟对寄主植物的嗅觉定向中起作用。