印度疟疾媒介库态按蚊卵黄蛋白原基因的克隆与生物信息学分析（英文）

卵黄蛋白原（vitellogenin,Vg)是主要的卵黄蛋白前体，在雌虫血餐之后在脂肪体内大量合成。卵黄蛋白原的调节元件已经被用于驱动蚊子（与寄生虫发生最大相互作用的场所）中抗寄生基因的组织特异性表达。不过，迄今为止，对在印度引起60%~70%疟疾发生的库态按蚊Anophelesculicifacies中的内源启动子尚未进行过分析。本研究通过PCR扩增了包括5′端上游调节区在内的库态按蚊A.culicifacies卵黄蛋白原基因，并命名为AncuVg(GenBank登录号为JN113091)。它含有一个大约6.2kb的开放阅读框，编码2052个氨基酸，具有一个16个氨基酸残基的推断的信号肽。也含有一个N_Vitellogenin区和一个VWF型D区，这两个区在其他昆虫卵黄蛋白原中也保守。估计多肽分子量为238.0kDa，含有4个共有的(RXXR/S)切割位点，C端附近有一个GL/ICG基序，其后是9个半胱氨酸残基和1个位于GL/ICCG基序上游第18个氨基酸残基处的DGXR基序。在推断的氨基酸序列上发现3个聚丝氨酸区，其中2个位于氨基端，1个位于羧基端。根据同义密码子相对使用概率值，通过有效密码子数，测定了蚊子卵黄蛋白原基因密码子的偏倚性程度。也预测了库态按蚊A.culicifaciesVg的三维结构。分析了AncuVg基因，以理解Vg基因的转录调节。对Vg基因5′端上游区进行的系统发育分析表明，它们聚类于蚊子的3大分枝。也用各种生物信息学工具分析分析了Vg的同源性和特征。