意蜂蜂王浆超氧化物歧化酶的分离纯化及部分性质

以意蜂Apismellifera蜂王浆为材料，经过硫酸铵分段盐析，DEAE-Sepharose柱层析和SephacrylS-200凝胶过滤，得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD)，纯化倍数104.00，比活力53.05U/mg。该SOD经SDS-PAGE显示单一蛋白带。温度对该酶活力的影响较小。Cu、Zn、Fe和Mn等元素含量测定发现该酶只含有Cu和Zn。酶经圆二色谱测定后，其α螺旋、β折叠和无规则卷曲蛋白构型的含量分别为26.1%、53.8%和22.0%。等电聚焦电泳测得酶的等电点为4.69、4.85和5.01。NR/R单向和双向SDS-PAGE表明该酶含有链内二硫键。氨基酸组成分析发现该酶由约402个氨基酸残基组成，其中Asp、Gly、Leu、Ala、Glu和Val的含量较高。脲可抑制SOD活性，并使其紫外光谱发生变化，荧光发射峰强度变小。溴乙酸（BrAc）抑制酶的活力，使其紫外光谱发生变化，荧光发射峰强度变小。二巯基苏糖醇（DTT）使酶的活力发生变化，紫外吸收峰增大，荧光发射峰变小。