黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC的原核可溶性表达及抗真菌活性测定

Drosomycin（Drs）是第1个从黑腹果蝇Drosophilamelanogaster体内鉴定发现的昆虫抗真菌肽因子。它对细菌无明显的抗性，但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用。此外，在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列，其中同系物Drosomycin-lC（Drs-lC）的抗真菌谱仅次于Drs。将Drs抗真菌肽基因(Drs)和同系物Drs-lC基因（Drs-lC）进行可溶性表达，对果蔬等农产品防腐保鲜的研究有应用前景。本实验将Drs和Drs-lC分别克隆到硫氧还蛋白（Trx）融合表达载体pThiohisA中，转化宿主菌TOP10，进行可溶性表达，并从诱导表达的菌液起始浓度、IPTG的诱导浓度及诱导时间等方面进行了表达条件的优化。结果表明2种融合蛋白Trx-Drs和Trx-Drs-lC大部分以可溶形式表达，可溶性表达的Trx-Drs在上清液中约占菌体总蛋白的22％。2种融合蛋白的表达产物经Ni-NTA亲和层析得到纯化。生测结果表明，2种融合蛋白分别对8种供试真菌中的5种真菌显示明显的抗性。