转双抗虫基因三倍体毛白杨外源基因表达及性状相关性分析

用部分改造的BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂（API）基因构建的双抗虫基因表达载体，通过农杆菌介导法转化了三倍体毛白杨PopulustomentosaCarr.，获得一批转双抗虫基因株系。对转基因株系的抗虫毒蛋白表达进行了ELISA和WesternBlot检测，同时用转基因株系叶片对杨扇舟蛾ClosteraanachoretaFabricius和舞毒蛾LymantriadisparL.幼虫进行室内饲虫试验，并对各项外源基因表达指标进行了相关分析。结果表明：在检测的28个转基因株系中，对杨扇舟蛾高抗株系占总参试系号的41％，中抗系号占35.0％，低抗系号占24％，对舞毒蛾高抗株系占参试系号的70％。转基因植株可明显抑制存活幼虫的生长发育，且不同转基因株系饲养的幼虫发育存在显著差异。连续两年相关分析表明，不同转基因株系幼虫死亡率间存在极显著相关。转基因植株对舞毒蛾和杨扇舟蛾均表达出抗虫性，并存在极显著相关。ELISA检测结果表明，不同转基因株系Bt毒蛋白表达量存在差异，变化在0.0011％～0.0161％。转基因植株对害虫的杀虫效果与Bt杀虫蛋白的表达量存在显著相关，表明Bt毒蛋白在抗虫效果中占有重要地位。转基因植株对卡那霉素表现出一定的抗性，但与抗虫程度相关不明显，单纯用卡那霉素作为筛选手段并不能完全反映植株的真实抗虫效果。