光滑鳖甲热休克蛋白70基因的克隆及表达

根据GenBank中发表的昆虫热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)基因的保守序列设计引物，利用PCR结合RACE扩增的方法，获得新疆荒漠昆虫光滑鳖甲Anatolicapolitaborealis热休克蛋白70基因，命名为APhsp70(GenBank注册号为EF569673)。测序结果表明，序列长为2092bp，由核酸序列推演出的蛋白质分子量为70kD，含653个氨基酸残基。基因结构分析表明APhsp70不含内含子序列。通过Northernblotting和半定量RT-PCR技术研究昆虫在受到不同温度胁迫时该基因的表达规律，结果表明：在45℃处理时，昆虫体内该基因的表达水平显著上升。并且，当机体受到-5℃低温胁迫并在室温恢复15min后APhsp70的表达量也显著升高；但是4℃和-10℃低温处理组APhsp70的表达未见明显变化。