斜纹夜蛾CecropinD成熟肽的原核表达及活性检测

采用RT-PCR方法从斜纹夜蛾Spodopteralitura脂肪体组织中扩增得到了CecropinD成熟肽基因序列，分析发现CecropinD成熟肽与斜纹夜蛾CecropinB之间存在2个氨基酸残基的差异。将获得的基因序列连接入原核表达载体pGEX-4T-1，并在原核细胞中实现了该蛋白的融合表达。SDS-PAGE结果表明，诱导后的宿主菌比未诱导菌中多出了一条融合蛋白表达带，诱导后1h就可以检测到该蛋白，从诱导后1h到5h该蛋白在表达量上没有明显的差异。生长曲线显示在IPTG诱导后宿主菌的生长受到明显的抑制，纯化后的蛋白对细菌具有一定的抑制作用。