小地老虎几丁质酶基因的克隆与序列分析

利用昆虫几丁质酶对几丁质的调控作用破坏几丁质新陈代谢的平衡来防治害虫,在生物防治策略中具有很大的发展潜力。从处于预蛹期的小地老虎Agrotlsipsilon(Hufnagel)体中肠内提取总的RNA,经反转录,利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）获得了几丁质酶基因的cDNA序列。该基因序列已经登录GenBank并获得登录号为EU035316。该序列长度为2823个碱基,含有一个1674个碱基的开放读码框。开放读码框编码558个氨基酸残基,预测的分子量为62.5kDa,等电点5.12。推导得到的氨基酸序列含有2个N-位糖基化位点，20个O-位糖基化位点,含有2个几丁质酶所具有的保守序列：N-端的催化区和C-端的几丁质结合区。氨基酸序列与其他昆虫,特别是鳞翅目昆虫的几丁质酶高度同源。