蝶蛹金小蜂毒液蛋白不同提取分离方法的比较

为了建立蝶蛹金小蜂Pteromaluspuparum毒液抑制寄主血细胞免疫活性组分合适的分离纯化方法，就等电点沉淀法、乙醇沉淀法、75%硫酸铵沉淀法、75%硫酸铵沉淀法+40℃加热处理法，以及75%硫酸铵沉淀法分别与3种不同滤膜的分子大小截留法的组合等7种方法对毒液蛋白分离效果及活性的影响进行了比较。结果表明：等电点沉淀法获得的组分抑制寄主菜粉蝶Pierisrapae离体血细胞延展和包囊的活性最强，乙醇沉淀法次之，75%硫酸铵沉淀法最弱。从蛋白组分的SDS-PAGE图谱来看，等电点沉淀法获得毒液组分相对最纯，仅有3条主要谱带，分子量大小在45～116.2kDa范围内；乙醇沉淀法次之，有5条主要谱带，分子量大小在24～116.2kDa范围内；硫酸铵沉淀法的谱带组成与毒液蛋白粗提液相似。3种分子大小截留法获得的毒液组分的活性分析表明，强活性组分分子量大小可能都大于100kDa。综合认为，7种方法中以等电点沉淀法提取分离蝶蛹金小蜂毒液蛋白相对为最适。