可用于黑刺粉虱快速鉴定的SCAR分子标记技术

针对粉虱类害虫难以准确快速地进行形态鉴别的问题,以局部发生的黑刺粉虱Aleurocanthusspiniferus(Quaintance)为对象,采用特征序列扩增区域(SCAR)标记法,研究其快速分子检测技术。利用SCAR标记技术获得了长度为987bp的黑刺粉虱特异性片段(GenBank登录号为FJ613323),根据此片段的碱基序列设计黑刺粉虱特异性引物1对(AS-F518/AS-R938),其扩增片段为421bp。种特异性检验结果显示,该对引物只对黑刺粉虱的基因组具有扩增能力,对同域发生的桔绿粉虱Dialeurodescitri(Ashmead)以及其他种类的粉虱如烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)B型、Q型、ZHJ-1型和ZHJ-2型,温室粉虱Trialeurodesvaporariorum(Westwood)以及螺旋粉虱Aleurodicusdisperses(Russell)等的基因组不具有扩增效果。该引物不仅对成虫具有良好的扩增效能,对卵、2龄若虫和拟蛹等亦具有同样的扩增能力,其最低检出限为1/1920头成虫。该技术体系的建立在茶树和柑桔苗木调运的害虫检疫和监测/检测中具有重要意义。