Cry1A毒素与二化螟中肠刷状缘膜囊泡受体蛋白配基结合分析

分离和鉴定二化螟Chilosuppresalis幼虫中肠刷状缘膜囊泡（BBMV）中Cry1A毒素的受体蛋白,对于阐明Cry1A毒素作用机理和二化螟抗性机理具有十分重要的意义。为此，本文就Cry1A毒素对二化螟杀虫活性及Cry1Ac与二化螟中肠受体的配基结合进行了研究。结果表明:Cry1Ab对二化螟室内品系(CN)的毒力高于Cry1Ac，而Cry1Ac高于Cry1Aa。配基结合分析表明二化螟CN品系幼虫中肠BBMV中有6个Cry1Ac结合蛋白(分子量分别为50，70，90，120，160和180kDa),其中180，160和90kDa结合蛋白的条带颜色明显深于其他结合蛋白的条带，表明这3个受体蛋白具有较高的结合浓度。同源竞争结合研究表明，180和90kDa结合蛋白为Cry1Ac的低亲合性结合蛋白，其他4个为高亲合性结合蛋白。为了研究Cry1Ac和Cry1Ab受体结合部位的相互作用，进行了异源竞争结合研究。Cry1Ab可以与Cry1Ac所有的6个结合蛋白进行竞争性结合，与180，120，70和50kDa结合蛋白具有高亲合性，而与160和90kDa结合蛋白具有低亲合性。结果显示，Cry1Ac与Cry1Ab在二化螟幼虫中肠BBMV上拥有多个共享的结合位点，但对每个结合位点的亲合性有差异。基于毒素结合部位的相似性，Cry1Ac和Cry1Ab不宜同时用于转基因Bt水稻来控制二化螟。