三带喙库蚊体内猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定

【目的】调查猪场蚊虫是否能携带猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒。【方法】采集发生PRRS疫情的3个养猪场蚊虫样本，采用RT-PCR方法检测PRRS病毒核酸，取阳性蚊虫样本接种Marc-145细胞进行病毒的分离培养，以间接免疫荧光抗体技术和分子克隆技术进行病毒的鉴定。【结果】养猪场内的蚊虫主要有三带喙库蚊Culextritaeniorhychus、凶小库蚊Culexmodestus、中华按蚊Anophelessinensis和骚扰阿蚊Armigeresobturbans，其中三带喙库蚊占86.76%；以PRRS病毒N基因引物进行扩增，三带喙库蚊样本呈现阳性反应，而其他蚊种均为阴性。在蚊虫接种的Marc-145细胞中可见细胞融合和空泡形成等细胞病变效应；用抗PRRS病毒N蛋白抗体和羊抗猪IgG(H+L)-FITC进行间接免疫荧光染色，感染细胞呈现黄绿色荧光；以NSP2基因引物进行RT-PCR扩增、克隆与测序，发现库蚊源病毒与相应猪场猪源病毒中相应基因的序列具有较高同源性。【结论】三带喙库蚊为猪舍优势蚊种，并能携带猪繁殖与呼吸综合征病毒。