美洲大蠊Pera7基因的克隆、表达及免疫学鉴定

根据原肌球蛋白基因序列设计引物，以我国南方地区美洲大蠊PeriplanetaAmericanaRNA为模板，用RT-PCR方法扩增出852bp的全长编码片段，经序列分析发现该基因与NCBI公布的Pera7有3个核苷酸发生改变。将目的片段克隆到pET24a(+)表达载体中，在大肠杆菌BL21Star获得表达，融合蛋白的分子量约为33kD。利用蟑螂过敏性患者血清对表达产物进行Westernblotting检测，出现明显的识别条带，说明表达产物具有IgE结合活性。