家蚕先天免疫基因Bmimd的克隆、表达及序列分析

昆虫的先天免疫应答由一组基因通过级联网络调控实现。果蝇Drosophila免疫缺陷(immunedeficiency,imd)基因在体液免疫信号传递途径中起着重要的作用。我们利用生物信息学方法进行电子克隆，成功地找到了imd基因在家蚕Bombyxmori中的同源体，命名为Bmimd。该基因全长1092bp，由4个外显子和3个内含子组成，开放阅读框(openreadingframe,ORF)长750bp，编码250个氨基酸，预测蛋白质分子量为28.6kD。Bmimd序列中含有一个致死结构域，经聚类分析表明该结构域与哺乳动物的受体相互作用蛋白(receptorinteractingprotein,RIP)相似。将该基因亚克隆到PET-50b载体进行原核表达，表达出了带有2个6×Histag和1个Nus·Tag标签的重组蛋白。Westernblotting结果表明Bmimd蛋白在5龄4天家蚕的头、脂肪体、生殖腺、表皮和中肠中都有表达，但丝腺中没有检测到表达。