家蝇金属硫蛋白基因的克隆、原核表达及活性检测

金属硫蛋白是一类普遍存在于生物体内、富含半胱氨酸的小分子蛋白，能螯合多种金属离子。本研究根据EST序列信息，利用RACE技术克隆到1条家蝇Muscadomestica金属硫蛋白基因MdMtn（GenBank登录号为GU289398）。序列分析表明，MdMtncDNA全长408bp，包含1个123bp的开放阅读框，编码40个氨基酸残基，其中半胱氨酸残基10个，呈-C-X-C-方式排列。此蛋白理论分子量为3.8kD，等电点为878。为了解家蝇金属硫蛋白对重金属的结合活性，构建了pET-DsbA-MT表达载体，并转化EscherichiacoliBL21（DE3）宿主菌进行融合表达。研究发现MT重组菌对重金属镉的耐受性得到了明显加强，提示MdMtn基因可能在家蝇适应重金属环境中起到积极作用。