家蚕细胞色素P450基因Bmcyp6u1的克隆、序列分析与表达谱

细胞色素P450第6亚家族基因为昆虫所特有，与抗性相关。为了检测家蚕Bombyxmoricyp6u1基因是否与耐氟性相关，首先克隆了cyp6u1基因。采用生物信息学方法获得与黑腹果蝇Drosophilamelanogastercyp6u1基因同源的家蚕B.moricyp6u1基因序列，预测该序列的开放阅读框（ORF）为1476bp，编码491个氨基酸，推定的蛋白质分子质量为56.15kD，等电点为9.23。以家蚕5龄第3天幼虫精巢cDNA为模板，设计特异引物PCR扩增出一条约1500bp的条带，大小与家蚕cyp6u1序列的ORF预测值接近，命名为Bmcyp6u1基因（GenBank登录号：HM130560）。同源性分析表明，Bmcyp6u1基因与蜜蜂Apismellifera的同源基因cyp6AS13的相似性为56%，与拟南芥Arabidopsisthaliana的cyp72A82的相似性为48%，与人Homosapiens的cyp3A7基因的相似性为50%。芯片数据分析表明，Bmcyp6u1基因在家蚕5龄第3天幼虫各组织表达量很低，只在精巢组织(5龄第3天)稍有表达，推测该基因具有组织特异性。