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ISSN: 2333-9721
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昆虫学报  2012 

甜菜夜蛾触角结合蛋白Ⅱ的cDNA克隆、组织分布及配体结合特性分析

, PP. 499-509

Keywords: 甜菜夜蛾,触角结合蛋白,基因克隆,组织表达谱,配体结合,荧光竞争结合实验

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Abstract:

触角结合蛋白(antennalbindingproteins,ABPs)是气味结合蛋白(odorantbindingproteins,OBPs)的一个亚类,推测其在昆虫嗅觉中起作用。为了探讨这一问题,本研究通过转录组数据分析并利用RACE技术,克隆了甜菜夜蛾Spodopteraexigua触角结合蛋白Ⅱ基因(SexigABP2)的全长cDNA序列(GenBank登录号为HQ234486)。序列分析表明,该基因开放阅读框长444bp,编码148个氨基酸,具有OBPs典型的6个半胱氨酸位点;其氨基酸序列和烟芽夜蛾Heliothisvirescens的HvirABP2的一致性最高,达72%。实时定量PCR分析显示,该基因主要在触角中表达,在喙、足、翅等组织中也有少量表达,且在雌蛾触角及足中的表达量显著高于雄蛾。进一步对该基因进行原核表达和纯化,利用荧光竞争结合实验测定了SexigABP2对35种气味物质的结合能力,发现其对甜菜夜蛾性信息素组分(Z)-9-十四碳烯醇和植物挥发物法尼醇的结合能力较强,结合常数分别为8.24μmol/L和8.14μmol/L。结合能力比较表明,SexigABP2对不饱和长碳链化合物较饱和短碳链化合物具有更强的结合能力;在不饱和长碳链化合物中,对醇类物质又较乙酸酯类物质具有更强的结合能力。结果提示SexigABP2可能参与了成虫对不饱和长碳链的植物挥发物的感受。

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