褐飞虱表皮蛋白基因NlICP的克隆及功能研究

表皮蛋白与几丁质结合构成抵御外界不良环境的昆虫角质层，在昆虫的生长发育及蜕皮硬化中具有重要的作用。为了探讨表皮蛋白基因在褐飞虱Nilaparvatalugens生长发育中的功能，本研究根据褐飞虱转录组测序信息，对其中1个预测为编码表皮蛋白的Unigene36450序列进行了克隆，并应用荧光定量PCR和RNA干扰（RNAi）技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。结果表明：克隆的Unigene36450全长cDNA开放阅读框长585bp，编码的蛋白含194个氨基酸，具有典型的表皮蛋白R&R保守结构域，命名为NlICP。转录水平的时序表达分析发现，NlICP仅在褐飞虱若虫期表达，且在3龄若虫体内表达量最高，提示该基因编码的蛋白属于幼虫表皮蛋白。RNA干扰结果显示，取食dsNlICP的1龄末2龄初（孵化后第3天）若虫在干扰6d和8d时，NlICP基因的表达量分别较取食dsGFP的对照组下降58.8%和45.6%，差异极显著(P<0.01)；干扰后部分褐飞虱若虫因蜕皮不完全死亡，干扰5d的存活率较对照下降26.7%。本研究结果提示，NlICP与褐飞虱若虫的生长发育及蜕皮相关，可以作为褐飞虱防治的潜在靶标基因。