康宁木霉K801纤维素酶cbh2基因的克隆及序列分析*

通过聚合酶链式反应（PCR）技术扩增得到纤维素高产菌株康宁木霉TrichodermakningiiK801纤维二糖水解酶（CBHII）基因全序列，并克隆到pGEM-TeasyVector。序列分析表明，所克隆的cbh2基因长1611bp，包含了纤维二糖水解酶基因的完整编码区序列，并含有三个真核生物典型的内含子序列，其中四个外显子序列共同编码一个471aa的蛋白质。该序列是国内首次克隆得到的cbh2编码区全序列，与国外报道的T.reesei已知序列的同源性达到99.89％,只有两个碱基差别，而推测的氨基酸序列只有一个位置疏水性氨基酸之间发生替代，在推测的氨基酸序列上发现3个潜在的N-糖基化位点。