粗毛栓菌木聚糖酶的纯化及性质

以麦草粉为基质培养粗毛栓菌Trametesgallica，浸提固态培养物得浸提液，后经超滤浓缩、硫酸铵盐析、Phenyl-SepharoseCL-4B疏水层析、DEAESepharosefastflow阴离子交换层析和SephadexG-150分子筛层析等分离与纯化步骤，获得部分纯化的木聚糖酶，其回收率和纯化倍数分别为1.45%和15.6。进一步经活性-PAGE回收，获得三种SDS-PAGE电泳纯级的木聚糖酶同工酶组分：XⅠ、XⅡ和XⅢ（按等电点从大到小排列）。三种组分分子量均约为19.0kDa；等电点分别为：5.6、4.7和4.0；含糖量分别为：0.25%、0.63%和3.4%；XⅠ既能降解木聚糖，又能降解纤维素；XⅡ的最适作用pH值为5.0，最适作用温度45℃；Mg2+、Fe2+对XⅡ有激活作用；Mn2+和Co2+有抑制作用；测得XⅡ的Km值为0.75mg/mL，Vmax为5,000mmoL/min?mg。