高雄山虫草无性型细脚拟青霉的核型分析

对高雄山虫草无性型细脚拟青霉的酶解条件、原生质体制备、电泳条件和核型进行了研究。以10mg/mL相同浓度的溶壁酶、纤维素酶和蜗牛酶配成混合酶解液，在30℃、120r/min振荡处理18h菌龄的菌丝2.5h，获得约107个/mL的原生质体悬浮液。浓缩至约108个/mL原生质体悬浮液与1.4%的低熔点琼脂糖等体积混合制胶，50℃蛋白酶K酶解48h，ET液洗3次（每次1h），浸没，4℃保存。以温汉逊氏酵母HansenulawingeiYB-4662-VIA和粟酒裂殖酵母Schizosaccharomycespombe972h-染色体DNA作为标准，利用钳位均匀电场脉冲电泳系统电泳，细脚拟青霉染色体组被分离成8条带，利用AlphaEaseFc软件分析，估计其大小在0.43－5.78Mb之间，大小分别为：0.43、2.45、2.55、2.88、3.28、3.94、4.70、5.78Mb，推测细脚拟青霉核型大小约为26.01Mb。