树状多节孢酸性磷酸酶的分离纯化与性质研究

树状多节孢Nodulisporiumsylviforme是从东北红豆杉Taxuscuspidata分离、可产生紫杉醇的内生真菌。研究以树状多节孢为材料，利用液体发酵手段获得菌丝体，通过CM-cellulose阴离子交换柱层析、Q-Sepharose阳离子交换柱层析和FPLC凝胶过滤层析（Superdex75），获得纯化的树状多节孢酸性磷酸酶蛋白（Nod-ACP）。结合FPLC和SDS-PAGE分析，判定该磷酸酶为分子量44kDa单亚基蛋白。酶学性质研究表明，其最适pH值为3.0，最适温度为58℃。6