小麦根腐病菌索氏平脐蠕孢SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测技术研究

由索氏平脐蠕孢Bipolarissorokiniana引起的小麦根腐病，常和其他土传真菌病害混合发生，传统的症状鉴别方法很难区分，导致病害防控难度增加。为建立病菌实时荧光定量检测体系，根据ITS序列设计引物，筛选出1对特异性引物BS-F/R，扩增片段大小为280bp。以菌丝DNA为标准品构建实时荧光定量标准曲线，并对其灵敏度、特异性、可重复性进行评价。结果表明，建立的实时荧光定量PCR检测方法速度快，灵敏度高，特异性强，重复性好。构建的荧光定量PCR标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系，溶解曲线的吸收峰单一，扩增效率良好。利用该定量检测体系，可以检测出田间小麦样品中52.8fg/μL的病菌DNA。