蛹虫草金属硫蛋白分离纯化及性质研究

研究探讨锌离子胁迫下蛹虫草Cordycepsmilitaris金属硫蛋白的产生及性质。蛹虫草菌丝体以15g/LZn2+在10L发酵罐中诱导培养56h后收集，产率为每升发酵液收集12.021g菌丝体（干重），细胞破碎取上清液通过两次凝胶柱层析，冷冻干燥得到蛹虫草金属硫蛋白纯品。利用Bradford法进行蛋白质含量测定，用银饱和分析法结合原子吸收光谱（AAS）测定MT含量，发酵终点处金属硫蛋白含量为12.876mg/g菌丝体（湿重）。用电喷雾质谱法测得金属硫蛋白的分子量为7390Da，用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得每分子蛋白质含有14个巯基、结合5个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示，每分子蛋白质共含57个氨基酸，其中含有13个半胱氨酸，疏水氨基酸占29.8%，且含有组氨酸。以上表明，研究中的蛹虫草金属硫蛋白与哺乳动物金属硫蛋白结构差异较大，但与酵母菌金属硫蛋白结构组成类似。