酿酒酵母和产朊假丝酵母原生质体的形成、再生及属间融合

使用由亚硝基胍诱变所得到的营养缺陷型作为单倍体融合亲株的核基因标记，周时也采用线粒体球红霉素抗性突变株的小菌落形式作为融合亲株的线粒体基因标记。酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)和产朊假丝酵母(Candidautilis)两亲株原生质体的制备是用对数生长早期的细胞在蜗牛酶和0.7MKcl及β-巯基乙醇或二巯基苏糖酵的作用下完成的。二者的原生质体的形成率在30一60分钟内达到90～99％。原生质体再生率，酿酒酵母最高为29—35％，产朊假丝酵母为7．5％。两亲株的原生质体在35％PEG(M·W·6，000)，10mMCaCl2条件下被诱导融合。在基础培养基上，长出以营养互补为标记的融合菌株。融合频率为10一一10-6。试验表明，这些融合菌株具有杂种的性质。其中一株杂合于在同化D一木糖、纤维二糖等的能力上比亲株明显增强。