蛋白质水力学半径的测定及用于蛋白质变性过程的实时监控

采用纳米粒度分析仪ZetasizerNano测定了牛血清白蛋白（BSA）的水力学半径，考察了pH、离子强度、表面活性剂等的影响，并用于BSA热变性和脲变性过程的实时跟踪。随pH增大，BSA水力学半径呈“U”形变化趋势;酸性条件下，分子膨胀，随着盐浓度升高，BSA分子先小幅减小后显著增大;中性pH范围，离子强度对蛋白质分子尺寸影响很小，蛋白质性质相对稳定。离子型表面活性剂在蛋白质表面吸附，从而影响BSA水力学半径。通过水力学半径的测量实时跟踪蛋白质变性过程的分子变化，发现增加热变性中离子强度可加快变性速率，SDS加入增大了BSA变性温度Tm。脲在促使BSA分子扩张的同时，对链伸展有抑制作用;在DTT存在下，BSA的水力学半径随着时间变化逐渐增大。结果表明，简便的水力学半径测量可以用于蛋白质大小的表征，并可实时跟踪蛋白变性过程的分子尺度变化。