手性醇脱氢酶与甲酸脱氢酶的融合蛋白体系的构建

为了在手性催化的同时实现辅酶的再生，利用源于红平红球菌Rhodococcuserythropolis的手性醇脱氢酶chiralalcoholdehydrogenase(READH)与来源于博伊丁假丝酵母Candidaboidinii的甲酸脱氢酶formatedehydrogenase(CbFDH)构建了一系列具有双酶活性的融合蛋白体系。分别为：1）READH的N端与麦芽糖结合蛋白maltosebindingprotein(MBP)的C端融合；2）CbFDH的N端与MBP的C端融合；3）READH的N端与CbFDH的C端融合；4）READH的C端与CbFDH的N端融合。结果表明：在所有的融合策略中，READH的活性都受到了较大的影响。READH在N端融合在CbFDH的C端后活性最高，但是此时CbFDH不具有活性。相反，READH的C端与CbFDH的N端融合后，CbFDH具有最高的活性。在READH的C端与CbFDH的N端融合的策略下，两者都具有活性。表明通过合理设计具有双重功能的融合蛋白，有望能提高其催化效率，为新型辅酶再生系统的建立提供基础。