棉花肉桂醇脱氢酶基因GhCAD3的克隆及原核表达

肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。本研究从棉花中克隆了一个CAD基因，命名为GhCAD3(GenBank登录号为FJ376601)。GhCAD3全长1573bp，具有1个1080bp的开放阅读框，5′非编码区为35bp，3′非编码区为458bp，编码359个氨基酸，预测分子量约为39116kD，等电点为748。氨基酸同源性分析发现，GhCAD3与其他CAD一致性为6413%。为了进一步研究GhCAD3基因的功能，构建了该基因的原核表达载体pET-28a-CAD3，经酶切鉴定后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE电泳分析表明，最佳诱导表达条件为05mmol/LIPTG在37℃下诱导7h。