水稻卷窄叶突变相关基因OsCSLD4的RNAi研究及表达分析

在图位克隆获得目的基因OsCSLD4的基础上，利用Invitrogen公司的Gateway系统将500bp的OsCSLD4基因cDNA编码序列以反向互补的方式插入pANDA35HK，构建了水稻卷窄叶突变相关基因OsCSLD4的干涉载体pANDAH05。利用农杆菌转化法将干涉载体pANDAH05及对照空载体pANDA35HK分别转化突变体原始亲本日本晴幼胚。转基因阳性植株表型观察结果显示干涉载体pANDAH05转化日本晴幼胚后，T0代植株出现了类似于突变体1ah137的表型，叶片明显变窄，卷曲程度增加，株高降低；对照空载体pANDA35HK转化日本晴幼胚后，T0代植株仍保持野生型表型；Real-timePCR检测结果显示日本晴转干涉载体pANDAH05后，目的基因表达量明显降低，干涉强度不同目的基因表达量降低程度不同，研究结果表明目的基因OsCSLD4在水稻叶片形态发育过程中起着非常重要的作用。