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ISSN: 2333-9721
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核农学报  2014 

杜氏盐藻磷脂酶C基因DsPLC的克隆及盐胁迫下的表达分析

DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2014.10.1773, PP. 1773-1780

Keywords: 杜氏盐藻,磷脂酶C,全长cDNA,生物信息学分析,实时荧光定量PCR

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Abstract:

为了研究磷脂酶C基因的结构与功能,采用RT-PCR和RACE技术从盐藻中克隆出了一种磷脂酶C基因(GenBankAccessionNo.KF573428),命名为DsPLC,并对其进行了生物信息学分析和盐胁迫条件下的表达分析.结果表明,DsPLC的cDNA全长2628bp,开放阅读框1782bp,编码593个氨基酸.该蛋白质为亲水性稳定蛋白,没有信号肽,也没有跨膜区域,是一种非跨膜蛋白,存在多个潜在的磷酸化位点,二级结构的主要元件为无规卷曲和α-螺旋.进一步的进化分析结果表明,盐藻与衣藻、团藻的亲缘关系最近.实时荧光定量PCR结果显示,正常情况下DsPLC的表达量很低,当受到高盐胁迫时表达量急剧升高,且在胁迫4h时表达量达到最高,是对照组的10倍左右,差异极显著(P<0.01),表明DsPLC可能在盐藻抵御外界盐胁迫的过程中起重要作用.这些研究结果为进一步阐明DsPLC的功能及其作用机制奠定了分子基础.

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