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ISSN: 2333-9721
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侵染甘薯的SPCSV、SPVG、SPFMV多重RT-PCR检测方法的建立及应用

DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.08.1464, PP. 1464-1470

Keywords: 甘薯病毒,褪绿矮化病毒,G病毒,羽状斑驳病毒,多重RT-PCR,检测方法

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Abstract:

为建立可同时检测甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)、甘薯G病毒(SPVG)和甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)多重RT-PCR检测方法,本文根据SPCSV热激蛋白基因(hsp70)及SPVG、SPFMV外壳蛋白基因(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计特异性引物,通过引物筛选,优化多重RT-PCR反应条件,建立了能同时检测SPCSV、SPVG和SPFMV3种病毒的多重RT-PCR检测方法。该体系能有效扩增出大小为304、433、601bp3个特异性片段。测序结果表明3种病毒与参考序列的一致性达94%~99%。应用建立的多重RT-PCR检测方法可稳定、准确、灵敏地同时检测单一或复合侵染3种甘薯病毒,为甘薯脱毒和病毒病诊断奠定基础。

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