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ISSN: 2333-9721
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核农学报  2015 

农杆菌介导抗根结线虫Btcry6A基因转化茄子的研究

DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.04.0685, PP. 685-691

Keywords: 茄子,植株再生,遗传转化,Bt,cry6A基因,根结线虫

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Abstract:

本试验以茄子下胚轴和子叶为外植体,通过对抗生素选择压筛选、不同抗生素抑菌效果比较、农杆菌侵染时间、预培养时间、共培养时间等条件优化,建立了适用于茄子的遗传转化体系,并利用农杆菌介导法将抗根结线虫Btcry6A基因导入茄子中,以期获得抗线虫的茄子材料,探索新的抗线虫育种途径,为利用茄子转基因技术培育和改良茄子品质提供理论依据.结果表明,75mg·L-1的卡那霉素可以有效地抑制愈伤组织的产生;200mg·L-1特美汀能够完全抑制农杆菌的生长;最佳侵染外植体为子叶,在预培养4d,侵染10min,共培养1d时转化率最高;获得的56株Kan抗性植株中有15株具有GUS活性;经过PCR、RT-PCR验证,初步确认Btcry6A基因已整合至茄子基因组中,并在转录水平上正常表达;根结线虫幼虫接种鉴定表明,转Btcry6A基因茄子再生植株对南方根结线虫抗性明显提高.

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