E.coli谷氨酸脱羧酶高产菌株选育及发酵条件研究

以普通大肠杆菌(E.coli)为出发菌株，以L-谷氨酸、溴甲酚绿(pH3.8~5.4)为筛选及指示剂，经亚硝基胍(NTG)、UV诱变处理，得到了L-谷氨酸脱羧酶活性变异菌株，其L-谷氨酸脱羧酶（GAD）活性大幅度提高，比出发菌株酶活性提高了2.22倍。优化实验显示pH值、发酵时间、诱导剂L-谷氨酸、硫酸镁对GAD产酶有较大影响。通过对产酶发酵培养基中几种成份单因素变动及正交优化实验，对该菌株产GAD的诱导剂L-谷氨酸、营养要求和发酵条件进行了研究，优化后的发酵培养基组成为牛肉膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠3g/L，L-谷氨酸0.5g/L，葡萄糖1.5g/L，磷酸二氢钾2g/L，硫酸镁0.7g/L。发酵条件是pH6.8，接种菌龄20h，发酵时间20h。在优化条件下突变菌株GAD活性可达6790.7U，是出发菌株的2.76倍。