印度芥菜BjJ10-2基因原核表达载体

利用RT-PCR技术克隆了印度芥菜核糖体相关膜蛋白RAMP4家族成员BjJ10-2基因的开放读码框，成功构建了pET32a-BjJ10-2原核表达载体，通过热激法将其转化到原核表达菌株BL21(DE3)plysS中，得到重组大肠杆菌BL21(pET32a-BjJ10-2)。SDSPAGE凝胶电泳检测到在IPTG诱导下BjJ10-2在BL21菌株中获得表达。利用分光光度计检测重组大肠杆菌BL21(pET32a-BjJ10-2)和对照菌株BL21(pET32a)的抗盐性，结果表明，过表达BjJ102的BL21菌株的抗盐性明显高于对照菌株，其抗NaCl的浓度可高达0.8mol/L。半定量RT-PCR的结果表明BjJ10-2基因响应盐胁迫，在印度芥菜根部其mRNA转录丰度显著增强，在8~12h达到峰值。说明BjJ10-2是一个新的盐胁迫响应基因，可能在植物抗盐生理过程中扮演重要角色。