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ISSN: 2333-9721
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核农学报  2015 

基于cDNA-AFLP的N+离子注入甘草当代根部基因表达分析

DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.06.1074, PP. 1074-1080

Keywords: 离子束诱变,甘草,cDNA-AFLP,基因表达差异

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Abstract:

为研究离子束注入对甘草基因表达的影响,本文用低能N+离子束注入甘草种子,以未经处理的同批甘草种子作为对照,利用cDNA-AFLP技术分析甘草幼根基因的表达差异;以甘草幼根总RNA为模板,通过反转录合成cDNA双链,使用PstI和MseI酶切双链cDNA,后经接头连接,预扩增,选择性扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳得到cDNA-AFLP图谱;9对选择性扩增引物总共出现条带1576条,差异条带286条,约占总条带的20%,对其中105个表达差异显著的片段进行测序,最终得到92个差异片段的核苷酸序列。通过Blast分析,其中53条测序序列检索到与之同源性高的DNA序列或已知功能的蛋白mRNA序列;成功构建离子注入甘草的当代根部基因表达cDNA-AFLP体系,证实了离子束注入甘草种子对当代甘草根部基因表达的影响,为建立甘草品质育种提供参考。

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