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ISSN: 2333-9721
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核农学报 2015

喹乙醇单克隆抗体的研制及其ELISA方法的建立

DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2015.06.1081, PP. 1081-1087

桑永玉,金仁耀

Keywords: 喹乙醇,单克隆抗体,竞争ELISA,饲料

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Abstract:

喹乙醇属喹噁啉类药物,因其抗菌、可提高蛋白同化作用而常被用作促生长剂,但研究发现,喹乙醇过量使用会蓄积毒性,可致畸致突变,因此为了加强喹乙醇的质量安全监控,需开展其快速检技术研究。本试验中喹乙醇半抗原(OLA-HS)采用琥珀酸酐法进行合成,质谱法鉴定;喹乙醇人工抗原(OLA-HS-BSA;OLA-HS-OVA)采用活化酯法制备,SDS-PAGE电泳和紫外扫描进行结果鉴定。BALB/C鼠免疫后取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经筛选、克隆最终得到1株能稳定分泌抗喹乙醇单抗的杂交瘤细胞株2B3。经鉴定,2B3的抗体类型及亚类均为IgG1,轻链为k链;制备腹水后测定其间接ELISA效价达1×10-6以上;制备的单克隆抗体特异性高,与喹乙醇结构类似物均无交叉反应。用此单抗建立的ELISA方法表明,检测灵敏度IC20值为5.36ng·mL-1;检测饲料中喹乙醇的平均添加回收率为70.7%~134.6%,准确性较好。喹乙醇单克隆抗体的研制和间接竞争ELISA分析方法的建立为下一步饲料中喹乙醇ELISA试剂盒的开发奠定了基础。

References

[1]	范国英,王建华,王自良,张改平,邓润广,杨继飞.链霉素残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及其性能测定[J].中国兽医杂志,2008,44(1): 82-84
[2]	金仁耀,桂文君,吴建祥,王春梅,朱国念.抗毒死蜱单克隆抗体的研制[J].浙江大学学报:农业与生命科学版,2006,32(6):591-597
[3]	王选年,杨艳艳,邢广旭,李青梅,样继飞.盐酸克伦特罗单抗快速检测试剂盒的研制[J].中国兽医学报,2004,24(1):75-78
[4]	Jin R Y,Gui W J,Guo Y R,Wang C M,Wu J X,Zhu G N. Comparison of monoclonal antibody-based ELISA for triazophos between the indirect and direct Formats[J]. Food and Agricultural Immunology,2008,19(1):49-60
[5]	吴建祥,王震成,金仁耀,刘欢,周崇盈,张少恩.抗氟喹诺酮类抗生素单抗的研制及其检测应用[J].核农学报,2013,27(12):1961-1967
[6]	吴建祥,林福呈,李德葆,陈正贤,娄沂春.稻瘟病菌单克隆抗体的研制及其对附着胞形成的影响[J].微生物学报,2000,40(6): 638-645
[7]	青玲,吴建祥,戚益军,周雪平,李德葆.蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体的研制及检测应用[J].微生物学报,2000,40(2):166-173
[8]	陈伯权,吴美英,叶群瑞.几种部分纯化单克隆抗体方法的比较[J].病毒学报,1990,6(2):122-126
[9]	金仁耀,吴建祥,朱国念,陈则利,寿林飞.抗克百威单克隆抗体的研制[J].农业环境科学学报,2006,25(4):1-5
[10]	Wu J X,Zhang S E,Zhou X P.Monoclonal antibody-based ELISA and colloidal gold-based immunochromatographic assay for streptomycin residue detection in milk and swine urine[J].Journal of Zhejiang University-SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology),2010,11(1):52-60
[11]	Abad A,Moreno M J,Montoya A.Development of monoclonal antibodybased immunoassays to the N-methylcarbamate pesticide Carbofuran[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,1999,47(6):2475-2485
[12]	宋春美,李青梅,刘庆堂,职爱民,张改平,王选年.喹乙醇单克隆抗体的制备及其免疫学特性的鉴定[J].核农学报,2010,24(4):777-783
[13]	赵春保,彭大鹏,陶燕飞,陈冬梅,袁宗辉.猪饲料中喹噁啉类药物酶联免疫检测方法的建立[J].中国农业科技导报,2008,10(2):69-75
[14]	杨吉成.细胞工程[M].北京:化学工业出版社,2008
[15]	马敬中,武冬梅,汪有生.喹乙醇在我国的应用研究进展[J].化学世界,2008,49(10):630
[16]	胡新岗,方希修,黄银云,王冬梅.喹乙醇饲料添加剂应用研究进展[J].动物科学与动物医学,2001,19 (5):64-65
[17]	邱楚武.喹乙醇在水产饲料中的作用及应用[J].兽药与饲料添加剂,2002,7(2):31-32
[18]	孙雷,韩嘉媛,汪霞,王树槐.喹乙醇的毒理学研究概况[J].中国兽药杂志,2008,42(1):41-44
[19]	中华人民共和国农业部. 2001年第168号公告:饲料药物添加剂使用规范
[20]	中华人民共和国农业部. 2002年第235号公告:动物源食品中兽药最大残留限量
[21]	余海霞,张小军,杨会成,郑斌.碱水解-高效液相,色谱法测定草鱼组织中喹乙醇代谢物的残留[J].中国渔业质量与标准,2012,2(1):67-70
[22]	薛良辰,彭玉芬,刘陆,蔡勤仁,冯家望,余以刚.超高效液相色谱-串联质谱法快速检测水产品中喹乙醇及其代谢物3-甲基-喹恶啉-2-羟酸的残留[J].现代食品科技,2013,29(2):413-415
[23]	宫秀杰.高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇含量[J].中国兽药杂志,2008,42 (10):32-34
[24]	Miao X S, Raymond E M, Chris D M.A tandem mass spectrometric study of the N-oxides,quinoline N-oxides,carbadox and olaquindox,carried out at high mass accuracy using electrospray ionization[J].International Journal of Mass Spectrometry,2003,230(2):123-133
[25]	Merou A, Kaklamanos G, Theodoridis G.Determination of Carbadox and metabolites of Carbadox and Olaquindox in muscle tissue using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J].Journal of Chromatography B,2012,881/882:90-95
[26]	Situ C,Elliott C T.Simultaneous and rapid detection of five banned antibiotic growth promoters by immunoassay[J].Analytical Chimica Acta,2005,529(1):89-96
[27]	朱学家,陈金兰,何计国.喹乙醇人工抗原的合成与鉴定[J].食品科学,2008,29(5):130
[28]	宋春美,高爱中,邓瑞广,职爱民,郅玉宝,侯玉泽,张改平.喹乙醇人工抗原的合成与鉴定[J].西北农业学报,2010,19(7):1-6
[29]	张景艳,杨志强,李建喜,王学智,孟家仁,张凯,张艳.食品中残留喹乙醇人工抗原的制备与鉴定[J].安徽农业科学,2009,37(5):1876-1877
[30]	金仁耀,吴建祥.庆大霉素单克隆抗体的研制及ELISA分析方法的建立[J].核农学报,2013,27(1):88-92

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