RAPD分子标记鉴定紫花苜蓿品种的反应体系优化

以中苜1号紫花苜蓿(MedicagosativaL.cv.ChongmuNo.1)为研究材料,通过对RAPD-PCR反应退火温度、反应体系中的模板DNA、Taq聚合酶、Mg2+、dNTP、引物用量的梯度处理,分别对各项单因子进行优化。结果表明,当退火温度为37℃,总反应体积25μl时,各反应物适宜用量为模板DNA80ng,Taq聚合酶1.5U,Mg2+6.25×10-5mmol,dNTP0.3×10-5mmol,随机引物0.4×10-5mmol,缓冲液KCl1.25×10-3mmol,扩增结果清晰、稳定,并且在不同实验室扩增结果具有较好的一致性。