百脉根原生质体的分离和酶解条件的研究

分别以百脉根里奥(LotuscorniculatusL.cv.Leon)无菌苗子叶及由下胚轴和子叶形成的胚性愈伤组织为供体材料,进行原生质体游离,研究不同酶解条件对原生质体分离的影响,以期为进一步开展属间体细胞杂交及培育新品种奠定研究基础。结果表明子叶和愈伤组织原生质体分离最适的酶液组合均为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%半纤维素酶、以及0.55mol·L-1甘露醇,产量及活力分别可达4.13×106个·g-1,65%和3.8×106个·g-1,67.4%;最佳酶解时间分别为6h和12h。预培养8~10d,CPW-10溶液中预质壁分离1h或预暗培养1d等预处理措施可显著提高愈伤组织原生质体的产量及活力(P<0.01)。