鹅副粘病毒F蛋白基因的克隆和序列分析

？？？？鹅副粘病毒分离株YG97经10日龄鸡胚增殖后纯化,提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR一次性扩增出与预期设计的1.7kb大小相符的特异性条带。将扩增产物提纯后克隆入pGEMR-T载体,经转化、筛选及酶切鉴定后,初步获得了含鹅副粘病毒F基因的阳性克隆,并进行了序列测定。序列分析表明:扩增的F基因片段的长度为1695bp,共编码553个氨基酸,F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为112R-R-Q-K-R-F117,与NDV的强毒株特征相符,同时也与鹅副粘病毒分离株致病性试验结果相符。同源性分析表明:与国内标准强毒株F48E9的核苷酸同源性为86%,与国内外部分发表的其他NDV毒株的核苷酸同源性在84%～89%之间,说明该毒株相对于经典的NDV在F基因上已发生了较大的变异