大肠杆菌F18菌毛A亚单位基因(fedA)的克隆与序列测定

？？？？利用PCR技术,分别从产F18ab菌毛的猪水肿病大肠杆菌分离株G及产F18ac菌毛的大肠杆菌8813株中扩增出510bp左右的F18菌毛A亚单位基因(fedA)。将这2个PCR扩增产物按预定阅读框架克隆入pGEX6p1载体的谷胱甘肽S转移酶(GST)基因的下游,筛选获得阳性重组质粒,并对质粒中的插入序列进行测定。序列分析表明:F18ab与F18ac的fedA基因的核苷酸序列同源性为97.6%,推导的氨基酸序列同源性为94.7%,两者的主要区别在于F18acfedA基因的第363bp处比F18ab多3个核苷酸,并出现一个新的酶切位点(NgoMI)