根癌农杆菌介导转化籼稻影响因素的研究

？？？？选用我国籼型杂交稻中的几个重要亲本,以携带有双元载体pCAMBIA1301的根癌农杆菌EHA105为载体,以GUS基因的瞬间表达为依据,研究根癌农杆菌介导转化籼稻的影响因素,确立对转化频率有重要影响的几个条件。结果表明:经短期预培养(4～5d)的幼胚是较为理想的转化受体材料;在共培养基中添加较高浓度的乙酰丁香酮(300～400μmol/L)可提高GUS基因的瞬间表达频率;以CC培养基作为共培养后抗性愈伤筛选的基本培养基有利于抗性愈伤组织的筛选培养。按此确立的条件,在特青、龙特甫(B)、珍汕97(B)、盐恢559等籼稻品种或亲本中的GUS瞬间表达率高达80%,抗性愈伤组织转化率高达70%