马立克病病毒囊膜糖蛋白E基因的克隆及序列分析

？？？？用聚合酶链式反应(PCR)技术,从中国广西分离的马立克氏病病毒(MDV)N株和G2株基因组DNA中,扩增出MDV糖蛋白E(gE)抗原基因片段的1500bp编码序列。将PCR扩增产物在KpnⅠ和HindⅢ位点克隆进pUC18质粒载体中,以Dig标记的gEPCR产物作为探针做斑点杂交及酶切分析筛选到含MDVgE基因的目的重组质粒pMNE、pMG2E。通过酶切位点分析显示,两毒株的gE基因内部酶切位点与MDVGA国际标准强毒株的酶切位点基本一致。对重组pMNE、pMG2E质粒进行部分序列测定,并用DNAStar软件分析,结果表明:插入序列与发表的GA株gE基因序列具有高度同源性,gE基因为高度保守基因。