慢性髓性白血病bcr-abl融合基因的克隆与表达

？？？？以慢性髓性白血病K562细胞总RNA为模板,采用RTPCR技术扩增包含bcrabl融合位点周围的基因片段,定向克隆到pGEX6P1载体谷光甘肽S转移酶(GST)的下游。将重组质粒转化大肠杆菌BL21菌株,以1.0mmol？L-1IPTG诱导bcrabl融合基因片段的表达,其产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,结果证实该融合蛋白分子质量约42ku。用该表达产物免疫ICR小鼠,所制备的抗血清可与K562细胞中特异性抗原反应,表明该bcrabl/GST融合蛋白具有bcrabl基因产物的特异抗原性。