奶山羊细菌人工染色体基因文库构建的初步研究

？？？？细菌人工染色体(BAC)文库是进行动物基因组学研究的一个重要手段,为配合山羊乳腺生物反应器的研究,对构建山羊基因组BAC文库进行了初步研究。用HindⅢ酶对莎能奶山羊基因组进行部分酶切,用CHEF(箝位匀强电场)二次电泳法回收150kb大小条带,电透析回收高分子量(HMW)DNA;同时以BAC载体pBeloBAC11为材料,分别采用限制性内切酶HindⅢ和HK脱磷酶对其进行酶切和脱磷,将该载体自连并通过凝胶回收线性段DNA,获得了可用于构建BAC文库的线性载体。将HMW与载体进行连接,电击转化感受态DH10β大肠杆菌,一次转化得到近2000个克隆。插入片段大小为50～200kb,基本满足建库的需要。