日本血吸虫magonashi基因的克隆表达及其功能研究

？？？？以日本血吸虫18d虫体的cDNA为模板,PCR获得？Sj？magonashi编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为441bp,将该序列提交至NCBI,登录号为GQ403668;应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况。结果表明:该基因在不同发育阶段均有表达,在13日龄童虫表达量相对最高,32日龄次之;在不同性别成虫虫体中,该基因在雄虫的表达量远高于雌虫,说明该基因为日本血吸虫性别发育差异基因。以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌中表达,表达产物分子质量为19？5ku,并以Ni-NTAHisBindResin纯化重组蛋白。Westernblotting试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得25？94％的减虫率和30？01％的肝脏减卵率。